Apt-Get 2′-F T7 Transcription Kit 2′-Fluoro-Pyrimidine Set

nr kat. E0905

Zestaw do syntezy RNA odpornego na RNAzy przy użyciu modyfikowanej t7 RNA polimerazy, umożliwiającej inkorporację 2′-fluoro analogów CTP i UTP. Powstały RNA posiada wydłużony okres „półtrwania” oraz jest niewrażliwy na szereg nukleaz. Zestaw zawiera wysokiej jakości odczynniki oraz mieszaninę rybonukleotydów: standardowych i fluoro-modyfikowanych w odpowiednich proporcjach, zapewniając zoptymalizowany system do syntezy RNA. Analogi 2′-fluoropirymidyn są często stosowane w technologii SELEX do syntezy aptamerów odpornych na nukleazy, wykorzystywanych w eksperymentach tłumienia ekspresji genów jako siRNA. Ponadto, fluoro-modyfikacje promują możliwość tworzenia struktury drugorzędowej w większym stopniu niż analogi 2′-aminowe, wykazując wyższą kompatybilność w reakcjach manipulacji RNA niż RNA z analogami 2′-O-Metyl.

Szacowany okres półtrwania fluoro-RNA w surowicach ssaczych, wynosi od 30 minut do kilku godzin – w porównaniu z niemodyfikowanym RNA, które szybko ulega degradacji w tych warunkach, uniemożliwiając wiarygodny pomiar stabilności.

Fluoromodyfikowany RNA jest w pełni kompatybilny z odwrotną transkryptazą z zestawu NG dART (nr kat. E0801).

W tym zestawie mieszanina rybonukleotydów składa się z: 5′-trifosforanu-2′-deoksy-2′-fluorocytydyny, 5′-trifosforanu-2′-deoksy-2′-fluorourydyny, a także z niezmodyfikowanych ATP i GTP. Uzyskane w syntezie fluoro-RNA zawiera więc wyłącznie fluoro-CTP i fluoro-UTP obok standardowych ATP i GTP.