RNaza I, niespecyficzna rybonukleaza, która hydrolizuje wiązanie fosfodiestrowe po wszystkich czterech zasadach. Jedyna dostępna RNaza, która rozszczepia wiązanie fosfodiestrowe wszystkich czterech zasad. Rozkłada RNA na cykliczne monofosforany nukleotydów pozostawiając 5′-OH i 2′-, 3′-cykliczny monofosforan. Preferuje jednoniciowy RNA w stosunku do dwuniciowego RNA. Nie wykazuje aktywności endonukleazy ani egzonukleazy  w stosunku do DNA. Idealna do przeprowadzania oznaczeń wymagających ochrony rybonukleazy. Przydatna do mapowania lub oznaczania ilościowego RNA przez selektywne cięcie jednoniciowych rejonów.