T4 RNA Ligase 1 katalizuje reakcję ligacji pomiędzy resztą fosforanową końca 5’ i resztą hydroksylową końca 3’ RNA lub DNA. Enzym katalizuje reakcję tworzenia wiązania 3´ → 5´ fosfodiestrowego z hydrolizą ATP do AMP i PPi. Substratami reakcji są jednoniciowy RNA i DNA oraz pirofosforany dinukleozydów.

Zastosowanie:

• Znakowanie końca 3’ RNA za pomocą cytydyno 3′,5′-bis[α-32P] fosforanu.
• Łączenie RNA z RNA.
• Synteza oligorybonukleotydów i oligodeoksyrybonukleotydów.
• Specyficzne modyfikacje tRNA.
• Ligacja oligodeoksyrybonukleotydów do cDNA w 5′-RACE (szybka amplifikacja końców cDNA).