GeneMAGNET Blood DNA Purification Kit jest przeznaczony do szybkiej izolacji całkowitego komórkowego DNA (genomowego i mitochondrialnego) z krwi ludzkiej pobranej na wybrany antykoagulant EDTA-K2, EDTA-K3, cytrynian sodu lub heparynę. Opracowano nowy bufor do lizy próbki krwi, uwolnienia DNA ze struktur komórkowych i umożliwienia wiązania DNA do kuleczek magnetycznych. Zanieczyszczenia usuwane są z roztworu podczas trzech etapów płukań. Elucję oczyszczonego DNA wykonuje się buforem niskosolnym, np.: zawierającym Tris-HCl, TE lub wodą destylowaną. Oczyszczony preparat DNA nadaje się do bezpośredniego użytku. Nie wymaga dalszej precypitacji etanolem.
 |
Fig 1. Amplifikacja fragmentów PCR o długości 1.1 kb, 3 kb i 23 kb na matrycy DNA izolowanej z ludzkiej krwi zestawem GeneMAGNET Blood DNA Purification Kit. Użyte odczynniki: Taq PCR Master Mix (2x) E2520 (1.1 kb i 3 kb) oraz Amplus DNA Polymerase EK2900 (23 kb). Ctrl-: kontrola negatywna reakcji. Matryca DNA naniesiona na żel: 8 μl DNA o stężeniu 57.5 ng/μl, A260/A280: 1.825, A260/A230: 1.855. 0.7 % agaroza 1x TBE. | ||||||||||||
 |
 |
||||||||||||
|
Fig 2. Wysoka wydajność reakcji qPCR przeprowadzona Fast SG qPCR Master Mix (2x) nr kat. E0411 na matrycy DNA uzyskanej zestawem GeneMAGNET Blood DNA Purification Kit z krwi pobranej na cytrynian sodowy (zielony) i EDTA (różowy). Ilość użytej matrycy od 0.001 ng do 80 ng DNA na 20 μl reakcji.
|
Fig 3. Produkt reakcji amplifikacji DNA przy użyciu matrycy izolowanej GeneMAGNET Blood DNA Purification Kit. Długość produktu reakcji 92 pz. amplifikacja qPCR Fast SG qPCR Master Mix (2x) nr kat. E0411, objętość reakcji 20 μl, ilość matrycy 0,01-10 ng DNA na reakcję. |
Linia GeneMAGNET opiera się na użyciu pokrytych krzemionką paramagnetycznych kuleczek (Magnetic Beads) do oczyszczania DNA i RNA. W celu osiągnięcia wysokiej wydajności i czystości otrzymanych kwasów nukleinowych, opracowano wyspecjalizowane bufory wiążące i płuczące, projektowane pod kątem optymalnego wykorzystania właściwości nowych kuleczek magnetycznych.
